Nachdem der Riddler (Stimme im Original: Matthew Gray Gubler) streng geheime Informationen von der Regierung gestohlen hat, beauftragt Geheimagentin Amanda Waller (C.C.H. Pounder) im Dienst von Gotham City eine Gruppe von Superschurken mit dem Codenamen „Suicide Squad“ damit, ins Arkham Asylum einzubrechen, um den Riddler zu fassen und die gestohlenen Informationen zurückzuerlangen. Schon bald erfährt Batman (Kevin Conroy) von dem riskanten Vorhaben und eilt zum Platz des Geschehens. Die Lage spitzt sich weiter zu, als Harley Quinn (Hynden Walch), die dem „Suicide Squad“ angehört, den Joker (Troy Baker) befreit. Der Kriminelle hat nicht nur die nötigen Mittel, um das Arkham Asylum hochzujagen, sondern gleich ganz Gotham City. Nun liegt es allein am dunklen Ritter dem „Suicide Squad“ das Handwerk zu legen und den Joker davon abzuhalten, die Bombe hochgehen zu lassen.
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